本试剂盒仅供科学研究使用，严禁用于医学诊断。尊龙凯时羊免疫球蛋白G2a（IgG2a）ELISA检测试剂盒专为科研设计，确保实验的准确性和可靠性。

使用说明书

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测。样品、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先涂布了免疫球蛋白G2a（IgG2a）抗体的微孔中，经过温育后彻底洗涤。使用底物TMB显色，反应生成的蓝色在酸性条件下转变为黄色。颜色的深浅与样品中IgG2a的浓度呈正相关，可以通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），进而计算样品浓度。

样本收集、处理及保存方法

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，避免细胞刺激，收集血液后以3000转速离心10分钟，迅速小心分离血清与红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂，3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液：以3000转速离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与生理盐水捣碎后，3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：样本若未及时检测，需按一次用量分装并冷冻保存于-20℃，避免反复冻融，解冻时需在室温下确保样品均匀解冻。

自备物品

所需设备包括：酶标仪（450nm）、高精度加样器及枪头（05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL）、37℃恒温箱。

操作注意事项

试剂盒应保存在2-8℃的环境中，使用前需在室温下平衡20分钟。如果浓缩洗涤液在冰箱中出现结晶属于正常现象，需通过水浴加热使其完全溶解。实验中未使用的板条应立即密封保存在低温干燥的条件下。

试剂盒组成

本试剂盒包含以下组件：微孔酶标板、标准品、样本稀释液、HRP标记的检测抗体、20×洗涤缓冲液、底物A、底物B、终止液、封板膜、说明书和自封袋。标准品的浓度依次为0、0.75、1.5、3、6、12 g/L。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液需按1:20比例稀释，具体为1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

洗板方法

手工洗板时，甩去孔内液体后每孔加入洗涤液，静置1分钟，重复洗板5次。自动洗板机则每孔注入洗液350μL，浸泡1分钟，洗板5次。

操作步骤

1. 从铝箔袋中取出所需的板条，剩余部分用自封袋密封放回4℃环境。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔加不同浓度的标准品50μL；样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL，空白孔不加。

3. 除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，封板并在37℃水浴或恒温箱中孵育60分钟。

4. 吸去液体并重复洗板操作，之后每孔加入底物A、B各50μL，避光孵育15分钟。

5. 加入终止液50μL，并在15分钟内在450nm波长下测定各孔的OD值。

结果判断

通过Excel绘图，绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，依据线性回归方程计算样本浓度值。

试剂盒性能

本试剂盒的准确性：标准品线性回归相关系数R值大于等于0.9900。灵敏度：最低检测浓度小于0.1 g/L。特异性：不与其他可溶性结构交叉反应。重复性：板内、板间变异系数均小于15%。贮藏条件为2-8℃，避光防潮。

免责声明

本试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，结果由实验者自行承担，尊龙凯时对此结果不负责任。请严格按照说明书操作，若违反操作指引后果自负。