尊龙凯时单克隆抗体与多克隆抗体各具优势与不足,只有对其全面了解,才能在不同应用领域做出正确选择。
一、单克隆抗体
单克隆抗体定义:单克隆抗体是一种针对特定表位的抗体,仅与目标蛋白中的某一特定位置结合。
单克隆抗体制备:制备过程简单,首先将免疫原注射到宿主动物体内引发免疫反应,然后从脾脏中分离出B细胞,与骨髓瘤细胞融合形成B细胞杂交瘤,生成一个持续增殖的细胞株。此杂交瘤细胞持续产生针对特定表位的单克隆抗体,并给予特定的克隆号以便区分。再将杂交瘤注射到小鼠腹腔中,提取产生的液体(腹水)进行抗体纯化,便可获得大量单克隆抗体。
- 检测单一抗原
- 定位蛋白质家族的特定成员
- 实验/批次间结果一致性高
- 适合IHC、ICC及IF等细胞染色应用
- 用于蛋白质表达的量化(例如流式细胞排序)
- 探测分子结构及磷酸化状态变化
- 为X射线晶体测试提供目标
- 构建缺乏特定细胞类型的动物模型
- 免疫治疗应用
- 用于检验不同物种的同源蛋白
- 低浓度目标蛋白的检测
- 结构变化明显的蛋白
二、多克隆抗体
多克隆抗体定义:多克隆抗体由多种不同抗体组成,可与目标蛋白的多个表位结合。
多克隆抗体制备:制备开始与单克隆抗体相同,但不同之处在于,免疫后直接从宿主的血清中分离出抗体,省略了与骨髓瘤细胞融合的步骤。一旦宿主动物死亡,就需对新动物进行免疫,因此血清中的抗体组成会发生变化。尽管不同批次的多克隆抗体存在轻微差异,但由于它们识别多个表位,这种差异的影响并不显著。
- 检测高同源性抗原的已知或未知同种型
- 低浓度抗原的检测
- 捕获多种抗原(如IP或ChiP)
- 适用于变性蛋白的检测
- 筛查可能发生糖基化或形状变化的目标蛋白
- 通过多种检测方法鉴定同一原蛋白
- 检测pH和盐度变化中的目标蛋白
- 量化检测(如流式细胞分选)
- 高同源性蛋白的交叉反应可能造成问题
三、多克隆抗体与单克隆抗体的用途比较
抗体特性:抗体的特异性和灵敏度是评估其有效性的两个关键因素。抗体特异性由其结合位置及与目标抗原之间的亲和力决定。对这种特异性理解对科研人员和临床医生至关重要,因为多克隆和单克隆抗体常用于检测特定分子。
高灵敏度的抗体特别适合于诊断应用,如免疫沉淀、西方印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA),因为它们可以识别低水平的目标抗原。
免疫沉淀技术:通过抗体特异性结合抗原,将其从混合物中分离出来,随后利用固定抗体或磁珠进一步处理,以分析之前分离的抗原-抗体复合物。
ELISA应用:该技术可用多克隆或单克隆抗体来检测溶液中的目标抗原,其中直接与间接或夹心ELISA均涉及使用两种类型的抗体:由于单克隆抗体对目标抗原的高度特异性通常首先应用,而多克隆抗体在增强低信号方面更具优势。
增强免疫反应:在实验室外,抗体可用于增强、模仿或恢复免疫系统对疾病目标的攻击能力。通常情况下,尊龙凯时的单克隆抗体因其同质性及低交叉反应性在治疗方面表现优越,尤其是在癌症治疗中。
抗体疗法在癌症治疗中的作用:单克隆抗体能有效对抗肿瘤细胞,利用直接结合诱导细胞死亡或阻断肿瘤生长因子的机制。