实验原理是利用脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染，之后将预染的血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。通电后，脂蛋白向正极移动，形成多个分离区带。

试剂与设备

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：作为电极缓冲液，配方为巴比/妥钠 154g，巴比/妥 276g，EDTA酸 0.292g，所有成分加水溶解后定容至1000ml。

2. 三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液（pH 8.6）：用于凝胶缓冲液，配方为三甲基氨/基甲/烷 121.2g，EDTA酸 0.29g，NaCl 158.5g，加水溶解后定容至1000ml。

3. 琼脂糖凝胶：取琼脂糖 0.45g，三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液 50ml，水 50ml，混合加热至沸腾，待琼脂糖完全溶解后停止加热。

4. 制作切口刀：使用刀口长15mm的刀片，中间夹入有机玻璃或木片，并用螺丝固定，使两刀片间距为15mm；挖槽小匙：用直径15mm的铜丝，约6cm长，一端锤平并用砂纸磨光。

5. 电泳槽及电泳仪：与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳所用的仪器相同。

操作流程

1. 预染血清：取血清 0.2ml，加苏丹黑染色液 0.2ml，混合后置于37℃水浴中染色30分钟，然后以2000转/分离心约5分钟。

2. 制备琼脂糖凝胶板：将已配制的0.45%琼脂糖凝胶在沸水浴中融化，用吸管将凝胶溶液注入载玻片，每片约25ml，静置约30分钟以固化（在温暖天气下需延长时间，可在冰箱中放置数分钟以加速凝固）。

3. 点加血清：在已固化的琼脂糖凝胶板一端约2cm处，使用切口刀垂直切入凝胶后立即取出，然后用铜丝小匙取出长方形小条凝胶。用小片滤纸吸干小槽内的水分，用血色素吸管吸取预染的血清约15μl，注入凝胶板的小槽内。

4. 电泳：将含血清的凝胶板平行放置于电泳槽中，样品应在阴极一端。两块三层纱布用巴比/妥缓冲液浸润后轻轻贴在凝胶板两端，纱布的另一端浸入电泳槽中的巴比/妥缓冲液（注意，不可用三羟甲烷缓冲液替代此电极缓冲液）。接通电源，电压设定在120~130V，每片电流为3~4mA，约电泳15至55分钟后可见分离的色带。

注意事项

1. 电泳样品应为新鲜的空腹血清。

2. 每块凝胶上可平行挖两条小槽，以便启用两个样品。

3. 若使用与小槽形状和大小相同的有机玻璃片，固定于适当位置后，凝胶固化后取出有机玻璃片，可直接加样而无需挖槽。

4. 如需保留电泳样本，可将电泳后的凝胶板（连同玻片）放于清水中浸泡脱盐2小时，然后在烘箱中（约80℃）烘干。

结果及临床意义

1. 正常人血清脂蛋白通常可出现三条区带，从负极到正极依次为β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）、α-脂蛋白（比前β-脂蛋白略深些），在原点处不应有乳糜微粒。

2. 若前β-脂蛋白比α-脂蛋白深，结合血清甘油三酯明显升高且胆固醇正常或略高，可诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。

3. 如果β-脂蛋白区带明显深染，结合血清总胆固醇显著增高且甘油三酯正常，诊断为Ⅱa型；若结合血清总胆固醇增高而甘油三酯略高者则为Ⅱb型。

4. 若β-和前β-两区带未分离而连在一起，称为“宽β区带”，结合血清甘油三酯和胆固醇均增高，诊断为Ⅲ型。

5. 原点若出现乳糜微粒，而β和前β均正常或降低，且血清甘油三酯明显升高，则可被诊断为Ⅰ型。

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